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“十二使徒教堂”再往前走，就是“圣母升天大教堂”。
克里姆林宫圣母升天大教堂（Cathedral of the Dormition），由意大利建筑家菲耶拉文蒂（Fieraventi，1415-1486）设计，兴建于1475年到1479年。这座教堂与俄罗斯的重要历史时刻紧密相连。1547年到1896年，历届沙皇都在这里举行加冕仪式。同时该教堂建成后，也是俄罗斯东正教会的所在地，其领导人被称为牧首，管辖着俄罗斯的所有东正教堂。此外，这里也是大多数俄罗斯东正教牧首（patriarch）去世后的埋葬地点。1917年俄国革命后，圣母升天教堂变为了博物馆。1990年，这个教堂恢复了1917年以前的东正教活动。
圣母升天大教堂位于克里姆林宫大教堂广场的北侧，紧挨着“十二使徒教堂”（Church of the Twelve Apostles），供奉升天的圣母玛丽亚。
俄罗斯人为什么会把这个教堂交给意大利建筑家来建造，主要原因是当时的俄罗斯人建筑技术较差，原来的老教堂仅存活了150年，就无法使用了。为此，莫斯科大公伟大的伊凡三世（Ivan III，1440-1505）专门邀请意大利人来建造教堂。
这是典型的俄罗斯东正教教堂，在建筑的布局上，与罗马天主教有极大的差异：罗马天主教堂通常只有一个圆顶，但俄罗斯东正教却有5个圆顶。按俄罗斯东正教的说法，中央的圆顶代表耶稣，其他4个圆顶代表耶稣的四名福音书使徒；天主教堂为拉丁十字的长方形结构，俄罗斯东正教堂为希腊十字的正方形结构；天主教堂通常有1个前殿和1个后殿，再加上两翼，两侧各有1条过道，俄罗斯东正教堂有5个后殿和3个前殿，既没有过道，也没有两翼。
西方建筑界将克里姆林宫的圣母升天大教堂视为大师级的建筑精品，教堂大量使用高强度的白色大理石，但在上层，却采用了远大于俄罗斯规格尺寸的特殊砖头，同时增加圆拱的使用，从而有效降低了负载。除了教堂中央使用4根科林斯立柱外，其余的壁柱都是高大但极为轻巧的壁柱。这使教堂内部明亮且宽敞。
“圣母升天大教堂”位于教堂广场的中央，它的顶端有５个金色的洋葱头。“圣母升天大教堂”是东正教的中心主教堂，1474年建成，由意大利建筑师“阿里斯托捷尔•费奥拉凡京”设计。它严格对称的造型和巨大的五圆顶，正体现了当时俄罗斯大公们对中央集权国家的追求和要求俄罗斯国家统一的思想。
“圣母升天大教堂”是克里姆林宫内最古老的东正教教堂，为俄罗斯东正教的中心和圣地。几百年来，它被视作俄罗斯国家最主要的教堂，在这里颁布最重要的国家法令，大公和沙皇在这里登基，后来历代皇帝在这里加冕。
“圣母升天大教堂”是一座由6个支柱，5个圆顶，6个后殿组成的教堂。东面坛后殿上的墙是用白色石头和砖头堆砌而成，且东面的方柱隐藏在祭坛屏障之后。其余的柱子是圆的，也是由砖堆砌而成，但是它们的对面柱子是用白色石头制成的。教堂的壁画在1482年至1515年间完成，著名的圣像画画家“狄奥尼修斯”和美术家“莫弗伊•亚尔茨”、“科尼”共同参与了壁画的绘制。在1642-1644年壁画被重新涂过，但它仍是克里姆林宫里现存最古老的壁画。
“圣母升天大教堂”是在意大利建筑师“阿里斯托杰里•菲奥拉万吉”带领下，以弗拉基米尔城古老的“圣母升天大教堂”为蓝本修建的，因此建筑艺术是典型的俄罗斯式，其内部十分宽敞，天棚上的墙壁也都是一些壁画。
“圣母升天大教堂”的墙壁和屋顶上有很多圣像画和彩色浮雕壁画，据说这里的圣像图共画有1000个左右的圣人。12世纪的《圣格奥尔基》像、13～14世纪的《圣三位一体》像还有著名的《弗拉基米尔圣母》都保存在这里。
在俄罗斯政治生活中这座教堂也起过十分重要的作用，它是俄罗斯各地诸侯向莫斯科大公宣誓效忠的地方，在“伊凡雷帝”给自己加上“沙皇”头衔以后，又成了沙皇加冕的教堂，靠南边还保存着于1551年建造的装饰有精美木雕的伊凡四世宝座。教堂内的银制吊灯据说是为了庆祝夺回被拿破仑军队掠夺走的300公斤黄金和5吨白银而建的。
教堂圆形的柱子上面满是壁画，同时这里保留了伊凡雷帝做祷告的场所和一些独具历史价值的墓室。该教堂曾经是东正教都主教和宗主教的墓地，历代莫斯科大主教，还有后来历代俄罗斯东正教总主教，都安息在这座教堂里，沿墙排列着他们的棺椁。
教堂内部，有大量的湿壁画和马赛克作品。最为古老的作品是《弗拉基米尔的圣母玛丽》，1131年由拜占庭传递到俄罗斯的弗拉基米尔，这是拜占庭的标准宗教像。1919年后，转往莫斯科特列季亚科夫美术馆（Tretyakov Gallery）保存。
巨大的圣像画面板也很出名，绘制于1547年，最上边的两层是后来增加的，有多个圣人画像。值得注意的是圣像画板中，还包括了沙皇吞并和征服地区的绘画作品，包括《沙皇对喀山的征服》。
